PCP實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級(jí)別。
一、PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要點(diǎn)說(shuō)明
1.主要結(jié)構(gòu)：
目前，PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的主體主要是彩色鋼板和鋁合金型材。房間內(nèi)的所有內(nèi)角和外角均由鋁合金R50內(nèi)圓鋁制成，解決了易污染，積塵，難以清潔的問題。另外，彩色鋼板結(jié)構(gòu)牢固，線條簡(jiǎn)潔，外形美觀，氣密性好。
2. PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分離和氣壓調(diào)節(jié)：
PCR過程分為四個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)域：試劑制備，樣品制備，PCR擴(kuò)增區(qū)域以及產(chǎn)物分析和檢測(cè)區(qū)域。整個(gè)區(qū)域都有一條整體的緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)域都配備了緩沖區(qū)，每個(gè)區(qū)域都通過氣壓進(jìn)行調(diào)節(jié)，以防止在整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過程中試劑和樣本受到氣溶膠的污染，并減少擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室的功能區(qū)分布：
① 基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的用房分區(qū)可分散布置，可集中布置；集中布置的分布原則是依次排列、獨(dú)立分區(qū)；4個(gè)基本分區(qū)可根據(jù)需要進(jìn)行遞增/減。
② 建筑上，緩沖間是阻隔空氣交換的首要措施。
③ 進(jìn)入工作區(qū)域應(yīng)嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，即：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)——標(biāo)本制備區(qū)——核算擴(kuò)增區(qū)——產(chǎn)物分析區(qū)
3.消毒：
紫外線燈安裝在四個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域和四個(gè)緩沖區(qū)的頂部以及透射窗內(nèi)部，用于消毒。
在試劑制備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)，還安裝移動(dòng)式紫外線燈，以對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)進(jìn)行局部消毒。
4.機(jī)械聯(lián)鎖不銹鋼傳送窗：
試劑和標(biāo)本通過機(jī)械互鎖不銹鋼（不建議使用電子互鎖方法）交付窗口 交付，以確保試劑和標(biāo)本在交付過程中不被污染（個(gè)人分流）。
5.地面
建議使用PVC卷曲地板或自流地板作為地面，其完整性要好。易于清潔且耐腐蝕。如果沒有條件，可以使用水磨石地面，或者大瓷磚的接縫（至少800mm×800mm）應(yīng)小于2mm。
6.照明
該燈應(yīng)為純凈燈，以達(dá)到易于清潔，無(wú)灰塵堆積的特點(diǎn)。
7.氣流
人流物流設(shè)計(jì)各行其道，避免交叉混雜，整個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)一個(gè)公用走廊，工作區(qū)域之間設(shè)計(jì)試劑物品傳遞專用窗，做到人物分流。
①物流：在試劑準(zhǔn)備區(qū)與標(biāo)本制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)與PCR擴(kuò)增區(qū)之間，以及擴(kuò)增區(qū)域和純化區(qū)之間設(shè)計(jì)有電子連鎖不銹鋼傳遞窗，以單向進(jìn)行試劑、標(biāo)本等物品傳送，配制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準(zhǔn)備區(qū)傳遞到標(biāo)本制備區(qū)，處理過的標(biāo)本通過單向傳遞窗由標(biāo)本制備區(qū)傳遞到PCR擴(kuò)增區(qū)，按照工藝流程逐次傳遞，避免返流。單向物品傳送系統(tǒng)既保障了標(biāo)本試劑不受污染，又保障了標(biāo)本試劑不污染環(huán)境。
②人流：人員通過閘間分別進(jìn)入各自實(shí)驗(yàn)區(qū)域，進(jìn)出各實(shí)驗(yàn)區(qū)域需要在閘間區(qū)域更換潔凈工作服，手消毒等。
8.壓差
PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)計(jì)為負(fù)壓潔凈室，通過壓差控制，使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染，并且降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
各個(gè)實(shí)驗(yàn)室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓，＞10Pa，實(shí)驗(yàn)與閘間之間的氣流組織方向?yàn)椋涸噭?zhǔn)備區(qū)空氣流向閘間，標(biāo)本制備區(qū)流向閘間，而PCR擴(kuò)增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴(kuò)增區(qū)，純化區(qū)同理；
同時(shí)按照試劑單向流方向，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間設(shè)計(jì)不同壓力梯度來(lái)實(shí)現(xiàn)單向氣流組織方向，由試劑準(zhǔn)備區(qū)（+20Pa）、標(biāo)本制備區(qū)（+15Pa）、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)（-5Pa）、純化區(qū)（-10Pa）、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)（-20Pa）、到后純化區(qū)（-25Pa）壓力逐漸降低，形成單向負(fù)壓壓力梯度。
9.其它安全設(shè)施
PCR實(shí)驗(yàn)室為潔凈空調(diào)系統(tǒng)，系統(tǒng)形式采用直流系統(tǒng)不回風(fēng)，防止交叉污染；試劑準(zhǔn)備間設(shè)計(jì)超凈臺(tái)，保證試劑免受空氣環(huán)境污染；標(biāo)本制備間設(shè)計(jì)生物安全柜，保證標(biāo)本不污染室內(nèi)環(huán)境，并保證標(biāo)本免受環(huán)境污染。
二、PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)遵循標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范
《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB19489-2008
《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]8號(hào)文
《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號(hào)文
《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)》衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號(hào)文附件
《基因檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求》國(guó)家質(zhì)監(jiān)檢驗(yàn)總局SN/T1193-2003
《潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境-生物污染控制》國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO14698
《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB500732013
《潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范》GB50591-2010
《室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18832002
《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB50346-2011《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》衛(wèi)生部(2004-11-12)
